破伤风毒素保护性抗原在毕氏酵母中的分泌表达

• 作者: 侯晓军 王慧 荫俊 邢洪光
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 破伤风毒素 保护性抗原 基因表达 毕氏酵母
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 32-35
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|Q936
• 字数: 2936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2004.01.007

摘要

采用PCR方法,从C.Tetani 64008菌株中扩增大小为1 353 bp的破伤风毒素与靶细胞起结合作用的重链C端基因(Tetc),直接连接pGEM-T 载体进行测序,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,经线形化的重组质粒电转化毕氏酵母细胞GS115和KM71,甲醇诱导获得了分泌表达,表达产物存在于培养上清中,占分泌蛋白的10%.通过免疫印迹可以检测到重组表达产物.活性测定表明,重组蛋白具特异结合活性.本研究通过实现破伤风毒素保护性抗原在酵母系统中的分泌表达,研究其影响因素,为其它细菌毒素蛋白高效可溶性表达,及进一步抗原片段介导保护性免疫研究及抗毒素制备奠定了基础.