A型肉毒毒素保护性抗原在酵母细胞中的表达与抗原性分析

• 作者: 王慧 荫俊
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: A型肉毒毒素 保护性抗原 分泌表达 酵母
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 562-564
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2405字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.06.019

摘要

目的:在酵母系统中实现A型肉毒毒素(BoNTa)Hc基因的可溶性分泌表达.方法:将Hc基因克隆入表达载体pPIC9K,用SacⅠ将重组质粒线性化,电转化巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris )GS115细胞,筛选G418抗性阳性整合子,进行Mut+表型株甲醇快速利用诱导.结果:经过体外高拷贝整合子的筛选和诱导表达条件的优化,毒素Hc在pH 6.5培养基 BMMY中实现稳定的分泌表达,最终筛选到蛋白表达量占上清蛋白10%的分泌高表达株.免疫印迹和酶联免疫检测结果显示,重组BoNTa Hc可以识别特异抗肉毒马血清并具良好的特异结合活性,可以诱导小鼠产生特异性抗体.结论:酵母系统来源的具有良好免疫原性的重组BoNTa保护性抗原可以作为有效的候选重组疫苗分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	荫俊	军事医学科学院微生物流行病研究所	50	131	6.0	9.0
2	王慧	军事医学科学院微生物流行病研究所	48	107	5.0	8.0