重组肉毒毒素B重链结合区片段的表达、纯化及其抗原性分析

• 作者: 康琳 王俊虹 王景林 谢亮 高姗
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒毒素B 克隆 表达 纯化 抗原性
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 127-130
• 页数: 4页
• 分类号: R996.1
• 字数: 3825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2006.02.007

摘要

目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素B重链结合区C端(BoNT/B Hc)保护性抗原片段.方法:采用PCR扩增BoNT/B Hc基因,插入表达载体pET-His,转化E.coli BL21(pLys)细胞获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/B Hc的抗原性.结果:表达工程菌BL21/pETHis-BHc于37℃经0.2 mmol/L IPTG诱导6 h后,目的蛋白获得高表达,约占菌体总蛋白的24%.经过Ni-NTA亲和层析柱一步纯化,rBoNT/B Hc的纯度可达96%以上.Western印迹和间接ELISA均显示其具有良好的抗原性.结论:成功克隆、表达并纯化了BoNT/B Hc片段,并可被抗天然BoNT/B马血清所识别,为建立快速检测方法和制备相应的抗体及亚单位疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王景林	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	44	147	6.0	9.0
2	谢亮	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	1	1.0	1.0
3	王俊虹	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	3	5	2.0	2.0
4	康琳	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	21	51	4.0	5.0
5	高姗	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	11	31	3.0	4.0