重组肉毒毒素E(BoNT/E)重链C端的表达、纯化及其抗原性分析

• 作者: 孙嗣梅 康琳 杨利敏 王利春 王景林 贾宏丽
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 肉毒毒素E 克隆 表达 固定化金属螯合亲和层析(IMAC) 抗原性
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 417-419,423
• 页数: 4页
• 分类号: R996.1
• 字数: 3898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.05.005

摘要

目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素E重链C端(BoNT/EHC2)保护性抗原片段,为BoNT/E的抗体制备和检测方法的建立奠定基础.方法:采用PCR扩增BoNT/EHC2基因,插入表达载体pET28a,转化E.coli BL21(DE3)pLysS获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/EHC2的抗原性.结果:表达工程菌pET28a-EHC2/BL21(DE3)pLysS于37℃用0.2 mmol/L IPTG诱导6 h,表达的目的蛋白可以达到全菌蛋白的37.9%.经过固定化金属螯合亲和层析一步纯化,rBoNT/EHC2的纯度可达95%以上.Western印迹和间接ELISA显示其具有良好的抗原性.结论:首次克隆、表达并纯化了BoNT/EHC2片段,并可被抗天然BoNT/E马血清所识别,为制备相应的抗体及建立快速检测方法做好了准备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王景林	军事医学科学院微生物流行病研究所	44	147	6.0	9.0
2	康琳	军事医学科学院微生物流行病研究所	21	51	4.0	5.0
3	贾宏丽	军事医学科学院微生物流行病研究所	5	10	2.0	2.0
4	杨利敏	内蒙古大学生命科学学院生物系	3	5	2.0	2.0
5	王利春	内蒙古大学生命科学学院生物系	6	17	3.0	4.0
6	孙嗣梅	军事医学科学院微生物流行病研究所	1	3	1.0	1.0