人甲状旁腺素在甲醇毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 何冰芳 刘志斌 李霜 王旭
• 来源期刊: 南京工业大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 甲状旁腺素 毕赤酵母 重组质粒 分泌表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: TQ467.4|Q933
• 字数: 3467字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7627.2004.04.011

摘要

选用酵母偏爱的密码子,人工合成长度为282bp的人甲状旁腺素(hPTH)基因,将其克隆于M13载体中,DNA测序验证正确.通过PCR从含有hPTH基因的M13载体获得了该基因,将其插入到含有AOX1启动子和α因子信号肽序列的表达载体pPIC9K中,构建了重组质粒pPIC9K-hPTH,电击法转化甲醇毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115菌株,经G418筛选得到高拷贝转化子,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明在9.3 kDa处有明显的诱导蛋白带,与报道的hPTH的相对分子质量相近;酶联免疫沉淀法(ELISA)检测证明表达的蛋白具有hPTH免疫活性为132 ng/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旭	南京工业大学制药与生命科学学院	8	112	2.0	8.0
2	李霜	南京工业大学制药与生命科学学院	87	705	13.0	22.0
3	刘志斌	南京工业大学制药与生命科学学院	5	84	4.0	5.0
4	何冰芳	南京工业大学制药与生命科学学院	91	785	14.0	24.0