HaSNPV 几丁质酶基因在大肠杆菌和昆虫细胞中的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用

• 作者: 张传溪 武家才 王芳 顾奇伟
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: HaSNPV 几丁质酶 原核表达 真核表达 Bt杀虫剂 增效作用
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 792-797
• 页数: 6页
• 分类号: S482.91|S482.3+9
• 字数: 6340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2004.06.015

摘要

为了探索杆状病毒几丁质酶对微生物杀虫剂的增效作用及其利用途径,分别在大肠杆菌和昆虫细胞中表达棉铃虫单粒包埋型核型多角体病毒(HaSNPV)几丁质酶.用PCR方法扩增出不含N端信号肽编码序列的几丁质酶基因片段,并分别克隆至原核表达载体pET28a和重组到杆状病毒Bac to Bac表达系统,在大肠杆菌(E.coli)BL21和粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞系Tn-5B1-4中分别进行了表达.在大肠杆菌中表达量约占细菌总蛋白15%,在昆虫细胞中表达量约占细胞总蛋白10%.将含有几丁质酶的大肠杆菌和昆虫细胞表达产物添加到苏云金杆菌(Bt)菌液中一起喂食2龄家蚕.结果显示,HaSNPV几丁质酶基因的2种表达产物和Bt杀虫剂的混合物使处理的家蚕的致死时间较对照处理均明显缩短.昆虫细胞和大肠杆菌表达产物与Bt混合物处理的LT50分别从93.5h和95.1 h缩短到56.2 h及67.2 h,并且供试家蚕的生长速度明显缓慢.研究结果表明,重组的HaSNPV几丁质酶有望作为Bt杀虫剂的增效剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王芳	浙江大学应用昆虫学研究所分子生物学实验室	116	864	16.0	25.0
2	张传溪	浙江大学应用昆虫学研究所分子生物学实验室	69	719	14.0	23.0
3	顾奇伟	浙江大学应用昆虫学研究所分子生物学实验室	3	42	3.0	3.0
4	武家才	浙江大学应用昆虫学研究所分子生物学实验室	3	19	1.0	3.0