α-amanitin线性肽骨架融合基因表达条件的优化

• 作者: 张杰 曹玫 朱建清 李达旭 杨志荣 王松涛 赵建
• 来源期刊: 四川大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: α-amanitin 加端PCR 融合基因 表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 页码范围: 869-873
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 3833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0490-6756.2004.04.042

摘要

利用加端PCR技术在pGEX-1λT质粒Bam H Ⅰ和PstⅠ位点间(片段BamH Ⅰ端)加入α-amanitin线性八肽碳骨架编码序列,再将两次连续加端PCR产物连入BamH Ⅰ、PstⅠ双酶切的pGEX-1λT载体,得到含α-amanitin线性碳骨架编码序列的阳性重组子pGAT-1.序列测定和结果分析显示,构建的融合基因相位正确,阅读框通读.通过对融合基因在大肠杆菌中表达条件的优化,目的融合蛋白的表达量可提高33.5%,占总蛋白表达量的28.3%.