小鼠MME基因真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 宋育林 梅俏 汪学龙 石海 董钟云 许建明 鲍俊俊
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞金属弹力酶 基因克隆 重组
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 19-21
• 页数: 3页
• 分类号: R392.12|R329.20
• 字数: 2563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2004.01.006

摘要

目的克隆小鼠巨噬细胞金属弹力酶(MME)基因结构域Ⅰ和Ⅱ,构建真核细胞表达载体,用于动物肿瘤原位种植模型的研究.方法通过PCR选择性扩增MME基因结构域Ⅰ和Ⅱ,克隆入pGEM-T载体中,限制性内切酶、DNA序列分析鉴定目的基因后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,并进行双酶切及PCR鉴定.结果以MME cDNA为模板进行PCR扩增的特异性片段在750 bp和1 000 bp之间.以此构建的pGEM-T-MME克隆载体和表达载体, 经限制性内切酶酶切证实载体中带有MME目的基因片段; 与小鼠MME cDNA序列的碱基符合率为99.63%; 证明MME基因已正确克隆到了真核细胞表达载体pcDNA3.1中.结论成功构建了pcDNA3.1-MME重组质粒,奠定了转基因研究MME表达与肿瘤生长转移关系的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许建明	安徽医科大学第一附属医院消化内科	242	1863	21.0	28.0
2	梅俏	安徽医科大学第一附属医院消化内科	108	678	12.0	20.0
3	石海	安徽医科大学第一附属医院消化内科	31	135	6.0	10.0
4	宋育林	安徽医科大学第一附属医院消化内科	28	248	9.0	15.0
5	汪学龙	安徽医科大学寄生虫教研室	113	471	11.0	16.0
6	鲍俊俊	安徽医科大学第一附属医院消化内科	1	6	1.0	1.0
7	董钟云	美国得克萨斯州大学M.D.Anderson癌症中心	1	6	1.0	1.0