构建cRNA作为标准曲线的实时RT-PCR检测方法

• 作者: 丁健华 付传刚 李闻捷 沈茜 蔡刚
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时PCR mRNA定量 cRNA标准品
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 172-174
• 页数: 3页
• 分类号: Q503
• 字数: 2506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2004.03.003

摘要

目的建立一种新的基于LightCyclerTM技术,并通过构建cRNA标准曲线来对目的基因进行定量实时RT-PCR的检测方法.方法以T7 RNA聚合酶体外转录合成带有目的片段的cRNA作为标准品,并与样本同时进行反转录和PCR扩增,用此方法来检测目的基因在结直肠组织中的表达.结果采用cRNA标准品制作的标准曲线具有较好的线性关系(r＞0.99),而且在每次实验中都能取得较好的扩增效率,CEA与GAPDH的扩增效率分别大于88.7%和87.4%.结论此方法能较为准确的对组织中的目的基因表达进行定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡刚	第二军医大学附属长海医院中心实验室	10	135	4.0	10.0
2	沈茜	第二军医大学附属长海医院中心实验室	184	1189	17.0	25.0
3	付传刚	第二军医大学附属长海医院普外科	2	8	2.0	2.0
4	李闻捷	第二军医大学附属长海医院中心实验室	71	494	12.0	18.0
5	丁健华	第二军医大学附属长海医院普外科	8	89	5.0	8.0