人纤溶蛋白酶原K5在毕赤酵母中的表达及其生物活性鉴定

• 作者: 吕红 宋大新 李育阳 沈利 高卜渝
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人纤溶蛋白酶原K5 酵母 分泌表达 内皮细胞增殖分析
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 879-883
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4029字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.06.013

摘要

化学合成人纤溶蛋白酶原K5(pK5)的编码基因并克隆到毕赤氏酵母表达系统的分泌型载体pPIC9K上,将重组质粒经BglⅡ单酶切后电转化Pichia pastoris GS115菌株,筛选出对G418有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子.经摇瓶发酵和甲醇诱导后,用15%SDS-PAGE检测发酵上清液,表明有重组蛋白pK5的高表达.经CM-Sepherose离子交换柱和Superdex 75分子筛层析两步分离纯化,获得了纯度达到98%的rpK5.用MTT方法检测的结果表明,纯化的rpK5可显著地抑制人血管内皮细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李育阳	复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	17	625	7.0	17.0
2	吕红	复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	30	130	6.0	10.0
3	宋大新	复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	11	43	4.0	6.0
4	高卜渝	复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	4	6	2.0	2.0
5	沈利	复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室	1	1	1.0	1.0