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摘要:
目的 研究人纤溶酶原 kringle 区缺失突变体(PLGΔK)的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达、产物纯化及理化性质鉴定.方法 采用7.5 L发酵罐对工程菌 PLGΔK/GS115 进行高密度培养、甲醇诱导表达,培液经离心、超滤、离子交换层析、凝胶滤过、透析后冷冻干燥.等电聚焦电泳、HPLC、质谱分别检测 PLGΔK 等电点、纯度和分子量;纤维蛋白平板、肽底物S-2403 分别测定PLGΔK 激活后的纤维蛋白和酰胺水解活性.结果 7.5 L高密度发酵可获得约为400 mg/L培液的表达量,经三步纯化后制备的PLGΔK纯度大于96%.理化分析显示PLGΔK的等电点为7.5~7.8,分子量:27.787 kD,比活性:23.6 U/mg.结论 初步建立了PLGΔK的酵母高密度发酵及纯化工艺,所制备半成品活性与血浆提取的PLG相近,具备放大生产和应用的潜力.
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文献信息
篇名 人纤溶酶原kringle区缺失突变体的毕赤酵母表达、产物纯化及鉴定
来源期刊 广东药学院学报 学科 工学
关键词 毕赤酵母 kringle区 纤溶酶原 缺失突变体 纯化
年,卷(期) 2009,(3) 所属期刊栏目 基础医学
研究方向 页码范围 299-303
页数 5页 分类号 TQ92
字数 3735字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 宋后燕 复旦大学分子医学教育部重点实验室 94 467 12.0 17.0
2 莫炜 复旦大学分子医学教育部重点实验室 22 92 6.0 9.0
3 陈武 广东药学院生命科学与生物制药学院 5 15 2.0 3.0
4 张艳玲 复旦大学分子医学教育部重点实验室 3 29 2.0 3.0
5 宋钢 复旦大学分子医学教育部重点实验室 2 6 2.0 2.0
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毕赤酵母
kringle区
纤溶酶原
缺失突变体
纯化
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广东药科大学学报
双月刊
1006-8783
44-1733/R
大16开
广州市大学城外环东路280号
46-148
1985
chi
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