有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库的构建

• 作者: 丰培金 付宝权 刘明远 卢强 李莲瑞
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 有丝分裂原 鲤鱼 外周血白细胞 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 568-570
• 页数: 3页
• 分类号: S91|Q78
• 字数: 2991字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2004.06.017

摘要

利用Stratagene公司HybriZAP-2.1建库试剂盒构建了经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库.采取健康鲤鱼外周血,分离白细胞,经LPS、PHA和ConA分组作用不同时间后,分别提取总RNA,将各组样品混合后,以Oligo(dT)纤维素柱分离纯化mRNA,经逆转录合成cDNA的第1链和第2链,与EcoRI接头连接,酶切后,用CHR0MA SPIN-400柱离心层析纯化,与HybriZAP-2.1载体连接,体外包装后转染E.coli XLI-Blue宿主菌,进行滴度测试和文库扩增.结果构建的经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库原始库容量为1.67×106pfu,插入片段长度在0.4×103～3.0×103bp,重组率为98.9%,扩增后的文库滴度为6.16×109pfu/mL,该文库符合cDNA文库构建的标准,为克隆和研究鱼类免疫应答相关基因提供了有效的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	付宝权	解放军军需大学动物科技系	8	67	5.0	8.0
2	刘明远	解放军军需大学动物科技系	25	283	10.0	16.0
3	卢强	解放军军需大学动物科技系	26	303	10.0	16.0
4	丰培金	解放军军需大学动物科技系	6	86	5.0	6.0
5	李莲瑞	解放军军需大学动物科技系	6	96	4.0	6.0