猪2型圆环病毒ORF1基因的克隆及表达

• 作者: 宋长绪 王贵平 蒋智勇 赵亚华 高向阳
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪2型圆环病毒 ORF1基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 3-7
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.2
• 字数: 2926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2004.05.001

摘要

根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV-2广东株(GD)ORF1基因进行PCR扩增,将扩增的ORF1基因克隆入pMD 18-T载体,获得的重组质粒命名为pMD-ORF1.将ORF1的KpnⅠ和XbaⅠ双酶切产物插入原核表达载体pBAD/gⅢ C得到重组子,命名为pBAD/gⅢ-ORF1.序列分析表明,克隆的ORF1与德国分离株AF201897核苷酸序列的同源性高达99.5%;与其他PCV-2株的核苷酸序列同源性为92.1%～99.9%,推导的氨基酸序列同源性为90.2%～99.5%.同时,测序结果表明,克隆的ORF1准确插入了pBAD/gⅢ C的多克隆位点,未改变读码框.用L-阿拉伯糖诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting分析,结果表明PCV-2 ORF1在pBAD/gⅢ C中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为41ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋长绪	广东省农业科学院兽医研究所	66	587	13.0	20.0
2	高向阳	华南农业大学生命科学学院	47	579	13.0	23.0
3	王贵平	广东省农业科学院兽医研究所	58	637	14.0	22.0
4	蒋智勇	广东省农业科学院兽医研究所	15	107	6.0	10.0
8	赵亚华	华南农业大学生命科学学院	31	339	9.0	17.0