猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 孙丽华 宋长绪 蒋智勇 郝永清 马红艳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: PCV1ORF1 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 666-669
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.2|Q786
• 字数: 3481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.08.007

摘要

根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1.测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%.将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1 ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋长绪	广东省农业科学院兽医研究所	66	587	13.0	20.0
2	蒋智勇	广东省农业科学院兽医研究所	15	107	6.0	10.0
3	郝永清	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	106	776	15.0	22.0
4	马红艳	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	2	8	1.0	2.0
8	孙丽华	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	6	17	3.0	3.0