抗五步蛇毒ScFv噬菌体显示文库的构建及表达

• 作者: 余敏 孙阳 尹惠琼 李刚山 王双印 范泉水 谭德勇 邱薇
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 五步蛇 蛇毒 单链抗体 噬菌体显示文库
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 338-340
• 页数: 3页
• 分类号: R392.13
• 字数: 2505字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库,并从中筛选出阳性克隆.方法:用五步蛇毒素免疫BALB/C小鼠,挑选其中效价最高的3只小鼠提取脾脏组织,抽提细胞总RNA,经RT-PCR分别扩增出VH、VL基因片段,经Linker连接成ScFv基因(single chain variable fragment),再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体,转化至大肠杆菌TG1中表达,经辅助噬菌体(Helper phage)M13K07拯救后建成噬菌体显示文库.结果:经4轮吸附-洗脱-富集筛选后,库容量达到4×108cfu/L,随机挑取90个克隆进行ELISA检测,结果16个呈阳性,并进行了重复验证.结论:成功构建出具有一定库容的特异性ScFv噬菌体展示库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范泉水		187	838	13.0	20.0
2	邱薇		70	283	9.0	13.0
3	谭德勇	云南大学生化学院生物技术系生化室	54	311	10.0	15.0
4	李刚山		24	126	6.0	10.0
5	王双印		20	118	6.0	10.0
6	余敏	云南大学生化学院	32	106	6.0	9.0
7	尹惠琼		21	67	5.0	7.0
8	孙阳		15	32	3.0	5.0