BPIm23重组抗菌蛋白在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 安云庆 杨贵贞 靖学芳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 杀菌/渗透增强蛋白 BPIm23重组抗菌蛋白 巴斯德毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 374-378
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R392
• 字数: 3776字
• 语种: 中文

摘要

目的:采用巴斯德毕赤酵母表达系统表达分泌型功能性rBPIm23抗菌蛋白.方法:利用构建的pUC18-synBPI414质粒和PBV220-BPIm420质粒,按分子克隆方法构建pPICZα-synBPIm600重组表达载体;用线性化pPICZα-synBPIm600质粒电转化Pichia pastoris GS115,筛选抗性转化子,进行PCR和Mut表型鉴定;用甲醇诱导目的蛋白rBPIm23的表达;用离子交换层析纯化rBPIm23,并进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定和用BCA法定量.结果:①成功构建了pPICZα-synBPIm600重组表达载体;②获得稳定整合目的基因的GS115菌株;③表达产物相对分子量约为23 kD,可与抗BPI抗体特异性结合;④培养上清液中目的蛋白表达量约为 2.9 mg/L.结论:BPIm23重组抗菌蛋白在毕赤酵母GS115中得到分泌表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安云庆	首都医科大学免疫系	50	269	9.0	15.0
2	杨贵贞	吉林大学基础医学院免疫系	43	379	10.0	18.0
3	靖学芳	首都医科大学免疫系	14	83	5.0	9.0