采用基因打靶技术构建结核分枝杆菌新基因 Rv0901缺失株的研究

• 作者: 吴悦涵 张会东 赵明才 赵计林 邱云青 鲍朗
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因敲除 基因,Rv0901 分枝杆菌,结核
• 年，卷（期）: 2004,（8）
• 所属期刊栏目: 短篇论著
• 页码范围: 1507-1510
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 3075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.08.044

摘要

目的:利用基因打靶技术构建基因打靶载体和基因缺失株,用于结核分枝杆菌基因Rv0901功能的研究.方法:结核分枝杆菌标准株H37Rv体外培养,对其Rv0901基因及两侧序列进行体外扩增,连接载体及目的片段,切除目的基因,再引入筛选标志构建重组自杀质粒,分别用酶切及PCR鉴定;用电穿孔法将重组自杀质粒转入结核杆菌H37RV株,用PCR鉴定.结果:经鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符,且为所需目的基因片段,成功切除靶片段;蓝白斑筛选证实标记基因插入片段插入方向正确;Rv0901基因缺失株用PCR鉴定成功缺失了目的基因片段2.5kb.结论:成功构建了用于结核分枝杆菌基因打靶的置换型载体和Rv0901新基因缺失株,为Rv0901基因功能的研究莫定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	邱云青	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	2	15	2.0	2.0
3	赵计林	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	5	39	4.0	5.0
4	赵明才	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	12	40	4.0	6.0
5	张会东	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	42	109	6.0	8.0
6	吴悦涵	四川大学华西医学中心感染免疫研究室	5	12	1.0	3.0