人衰变加速因子在CHO细胞的表达及其衰变加速活性研究

• 作者: 吴玉章 李华 许桂莲 谢佩蓉 邹强 郑萍 郭波 马正伟
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 补体 衰变加速因子 CHO细胞 51Cr释放法
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 576-579
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11|R394-33|R394.2
• 字数: 2690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.07.005

摘要

目的获得稳定表达人衰变加速因子(human decay-accelerating activity,hDAF)的中国仓鼠卵巢(Chinese hamsterovary,CHO)细胞系,观察在补体活化情况下,hDAF对异种细胞的保护作用.方法构建真核表达载体DAF-pcDNA3.1,用脂质体转染法将其导人CHO细胞,有限稀释法筛选稳定表达hDAF的单细胞克隆,流式细胞仪检测hDAF的表达,C3沉积实验和51Cr释放法测定其促补体衰变活性.结果成功构建了真核表达载体DAF-pcDNA3.1,并获得了表达hDAF的单细胞克隆,表达hDAF的CHO能减少补体C3的沉积,减弱补体的杀伤作用.结论获得在细胞膜上稳定表达具功能活性的hDAF的CHO克隆,为进一步研究其结构与功能的关系准备了条件.