HSP90高表达细胞株的建立及细胞应激反应的改变

• 作者: 邹飞 陈雪梅
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白质90 NIH-3T细胞 转染 应激
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 523-527
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 2926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.04.007

摘要

目的:建立稳定高表达热休克蛋白90(HSP90)细胞株,研究HSP90高表达对细胞应激反应的影响.方法:含人HSP90β全长基因的重组质粒pSmycHSP经克隆、纯化、酶切鉴定后,用电穿孔法转染到小鼠成纤维细胞系NIH-3T3细胞内.经G418筛选、克隆分离培养,用免疫荧光、免疫印迹鉴定阳性克隆.用高温作用(44℃,20min、40min)模拟氧化应激环境,以转染空质粒的NIH-3T3细胞为对照,全自动生化分析仪观测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出活性变化、流式细胞仪测定DNA受损细胞数,分析细胞应激状态对细胞膜和DNA的损害及HSP90高表达对细胞应激反应的影响.结果:转染pSmycHSP的NIH-3T3细胞HSP90免疫荧光染色增强;与对照相比,44℃,20min时培养液中漏出的LDH无显著差别,DNA损害加重;44℃,40min时LDH漏出减少,DNA的损害减弱.结论:已建立稳定高表达HSP90 NIH-3T3细胞株;HSP90高表达在不同的应激强度下对细胞的影响呈现复杂性,其应激保护作用与应激强度密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雪梅	第一军医大学高温医学研究室	7	74	3.0	7.0
2	邹飞	第一军医大学高温医学研究室	63	313	10.0	14.0