人HMGB1 A box和B box cDNA的克隆与表达

• 作者: 何凤田 张艳 李蓉芬 杨朝辉 连继勤 高会广
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1365-1368
• 页数: 4页
• 字数: 3937字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.06.027

摘要

目的:克隆人HMGB1中的A box(1-85 aa)和B box(88-162 aa)的cDNA,构建重组原核表达载体并对其诱导表达,为检测其生物学活性做准备.方法:提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RT-PCR扩增出人HMGB1 A box和B box的cDNA序列,并分别克隆至载体pUC19进行序列测定,随后分别构建于高效原核表达载体pQE-80L/DHFR中,经IPTG诱导4 h后,可表达Mr约35 000,34 000的融合蛋白.Western Blotting鉴定所表达的目的蛋白.结果:经RT-PCR扩增得到了255 bp和225 bp的DNA片段,经序列分析与GenBank中报道的已知序列完全一致,构建了含融合蛋白的重组表达质粒,诱导表达了目的蛋白,经Western B1otting证实,在Mr分别约为35 000和34 000处有两条清楚的蛋白带.结论:HMGB1 A box和B box cDNA的克隆,原核表达载体的构建及目的蛋白的表达鉴定,为进一步研究HMGB1A box和B box的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张艳	中国人民解放军第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室	92	498	14.0	19.0
2	何凤田	中国人民解放军第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室	5	6	2.0	2.0
3	李蓉芬	中国人民解放军第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室	2	3	1.0	1.0
4	连继勤	中国人民解放军第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室	4	22	2.0	4.0
5	杨朝辉	中国人民解放军第三军医大学基础部生化与分子生物学教研室	13	20	3.0	4.0