人肝脏再生增强因子cDNA的克隆、表达及产物活性鉴定

• 作者: 毛积芳 蔡在龙 陈世敏
• 来源期刊: 实用医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝脏再生增强因子 克隆 表达 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 331-333
• 页数: 3页
• 分类号: Q75|R329.28
• 字数: 2817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4008.2004.04.031

摘要

目的通过对人源肝脏再生增强因子(Augmenter of liver regeneration,ALR)cDNA进行克隆、表达及表达产物活性的初步鉴定,为基因工程大量制备重组hALR (human Augmenter of liver regeneration,ALR)及其临床应用提供资料.方法提取人胎肝总RNA,通过RT-PCR获得全长hALRcDNA,构建原核融合表达质粒pGEX-4T-3/hALR cDNA,转化大肠杆菌诱导表达融合蛋白.MTT法及小鼠CCl4肝衰竭模型检测重组hALR的生物学活性.结果测序证实克隆得到的hALR序列完全正确.SDS-PAGE检测表达产物分子量约41kD,与融合蛋白GST-hALR的预期分子量相吻合.MTT比色结果为21.9ng/ml hALR对Hep3B细胞系的促增殖作用显著高于对照组(P＜0.05).体内活性检测结果表明hALR能显著提高CCl4诱导肝功能衰竭动物的存活率(X2=3.923,P＜0.05).结论重组hALR的制备过程简单易行,可通过基因工程方法大量生产.活性检测表明hALR具有促肝细胞增殖和肝功能修复的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈世敏	济南军区总医院实验诊断科	38	171	8.0	11.0
2	毛积芳	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	31	225	9.0	14.0
3	蔡在龙	第二军医大学生物化学与分子生物学教研室	36	167	7.0	10.0