人肝再生增强因子cDNA的克隆及其酵母双杂交载体的构建

• 作者: 佟明华 姚汝华 孔祥平 易学瑞 潘韵 陈思强
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝再生增强因子 酵母双杂交系统 克隆
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 187-190
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 3612字
• 语种: 中文

摘要

目的:获取人肝再生增强因子(hALR)阅读框的cDNA及构建其酵母双杂交系统的"诱饵"质粒.方法:利用RT-PCR方法,从人胎肝组织中扩增出一约380 bp的DNA片段,重组入pGBKT7载体中,构建成pGBKT7-hALR,然后研究此重组质粒在酵母AH109中的表达情况并用于筛选人肝cDNA文库.结果:获得的378 bp的DNA序列与文献报道的人ALR序列一致;转化的酵母菌在选择性培养基SD/-Trp上培养65小时,长出约Φ1 mm大小的白色菌落,而在SD/-Trp/-His上不生长;酵母提取液的Western blot分析,证实ALR基因在AH109以融合蛋白的形式表达,并具有免疫活性;初步得到hALR相互作用的阳性克隆.结论:pGBKT7-hALR对宿主菌AH109没有毒性作用,也没有自身激活报告基因,可作为酵母双杂交系统中的"诱饵"质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚汝华	华南理工大学生物工程系	86	1231	22.0	29.0
2	佟明华	解放军第458医院传染病中心	18	53	4.0	6.0
3	孔祥平	解放军第458医院传染病中心	46	182	7.0	11.0
4	陈思强	华南理工大学生物工程系	5	14	3.0	3.0
5	易学瑞	解放军第458医院传染病中心	18	70	4.0	8.0
6	潘韵	浙江大学农业工程与食品科学院	4	23	1.0	4.0