两种启动子调控下PNP基因载体的构建和差异性表达

• 作者: 刘址忠 周鹤俊 林菊生 梁扩寰 蔡晓坤
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 肝癌
• 页码范围: 2036-2040
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.09.006

摘要

目的:分别构建巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)通用启动子和甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)杂合启动子[HRE]AF调控的PNP基因表达载体并检测、分析二者的差异表达.方法:将[HRE]AF启动子插入载体pcDNA3.0,构建肝癌细胞特异表达载体p[HRE]AF;将PNP基因分别插入pcDNA3.0和p[HRE]AF,构建两种启动子调控的PNP基因表达载体pcDNA3.0/PNP和p[HRE]AF/PNP;经酶切、PCR及测序鉴定各重组体.用脂质体介导法将两PNP基因载体转染不同细胞株,RT-PCR检测PNP基因在各细胞株中表达,分析二者表达的特点.结果:各目的片段均成功插入相应载体中,CMV启动子调控的PNP基因在各株细胞中均实现了表达,而[HRE]AF启动子调控的PNP基因则在AFP阳性和阴性肝癌细胞中实现了组织特异性表达.结论:两PNP基因表达载体是肝癌基因治疗中新型、高效的治疗载体,p[HRE]AF/PNP还实现了在AFP阳性,尤其是AFP阴性肝癌细胞中的靶向性表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林菊生	华中科技大学附属同济医院消化内科肝病所	113	535	12.0	17.0
2	蔡晓坤	华中科技大学附属同济医院消化内科肝病所	13	73	4.0	8.0
3	梁扩寰	华中科技大学附属同济医院消化内科肝病所	60	294	10.0	14.0
4	刘址忠	华中科技大学附属同济医院消化内科肝病所	9	39	2.0	6.0
5	周鹤俊	华中科技大学附属同济医院消化内科肝病所	9	51	4.0	7.0