黑曲霉pepD基因阻断突变菌株的构建及功能分析

• 作者: 唐国敏 彭远义 王华明 王敖全 赵春田
• 来源期刊: 菌物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源重组 外源蛋白 分泌表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 360-366
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.97
• 字数: 3654字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-6472.2005.03.010

摘要

运用同源重组技术破坏了黑曲霉基因组中的pepD基因,该基因编码一种类subtilisin的胞外蛋白酶PEPD.实验以黑曲霉GICC2773基因组DNA为模板,PCR扩增pepD基因,并在此基因中间插入潮霉素抗性基因(hph)表达单元,由此产生了3.7kb的pepD阻断基因片段.将此阻断基因片段与载体pBS连接,构建成pepD基因阻断质粒pBSDH.采用原生质体一CaCl2/PEG法将酶切阻断质粒得到的含pepD基因和hph表达单元的3.7kb线性片段转化Aspergillus niger GICC2773菌株,在含潮霉素的平板上筛选潮霉素抗性转化子,从这些抗性转化子中经PCR检测分离到到1个pepD基因阻断突变菌株△pepD66.外源漆酶分泌活性分析显示,黑曲霉pepD基因的破坏使其外源漆酶的分泌表达有所提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭远义	西南农业大学动物科技学院	16	221	7.0	14.0
2	唐国敏	中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室	14	181	7.0	13.0
3	王敖全	中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室	13	120	5.0	10.0
4	赵春田	中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室	1	5	1.0	1.0