柱花草nptⅡ、hpt和bar基因优化转化体系的建立

• 作者: 段瑞军 符少萍 胡新文 郭建春
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 柱花草 转化体系 nptⅡ hpt bar
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 页码范围: 232-237
• 页数: 6页
• 分类号: Q781
• 字数: 5529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2005.03.008

摘要

以热研5号柱花草(Stylosanthes guianensis cv.Ryan No.5)为材料,系统地研究了不同选择标记基因NptⅡ、hpt和bar的柱花草转化体系.研究发现柱花草最适合基因转化的外植体是幼苗下胚轴.最佳愈伤组织形成和愈伤组织分化培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 4.0 mg/L+3%蔗糖,pH6.最适宜外植体生根培养基是MS+NAA 0 mg/L+3%蔗糖(pH6).Glufosinate选择压力为0.15 mg/L,Kanamycin选择压力为20 mg/L,Hygromycin选择压力为15 mg/L.在以上的优化转化系统中,柱花草幼苗下胚轴分别侵染带NptⅡ,hpt和bar基因的农杆菌(GV3101)后,可获得30%愈伤组织具有kanamycin抗性,5%愈伤组织具有Hygromycin抗性,50%的愈伤组织具有Glufosinate抗性.