重组腺病毒人内皮抑素的质量标准研究

• 作者: 李响 李永红 王军志 袁力勇 赵阳 韩春梅 饶春明 高凯
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 内皮抑素 质量控制 基因治疗
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 138-142
• 页数: 5页
• 分类号: R917
• 字数: 5125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2005.02.013

摘要

目的: 建立重组腺病毒人内皮抑素的质量标准和检测方法. 方法: PCR法鉴定腺病毒载体的E2B区和插入基因,琼脂糖凝胶电泳检查重组病毒DNA酶切图谱.分光光度法测定病毒颗粒数,TCID50法测定病毒感染滴度.感染人肝癌细胞HepG2测定插入基因的表达量,感染人血管内皮细胞HM2测定表达产物的生物学活性.病毒的纯度分析采用A260/A280比值和HPLC法进行.采用A549细胞进行复制型腺病毒的检测.结果: 腺病毒载体E2B区和插入基因PCR扩增结果与理论相符,重组病毒DNA的酶切图谱与标准品一致.原液病毒颗粒数为2.4×1012 VP/ml,滴度为1.53×1011 IU/ml,比滴度为6.4% IU/VP;成品病毒颗粒数为1.0×1012 VP/ml,滴度为3.75×1010 IU/ml,比滴度为病3.8% IU/VP.以50 MOI重组腺病毒感染HepG2细胞48 h后培养上清人内皮抑素表达量为332 ng/ml.50 MOI重组腺病毒对血管内皮细胞生长的抑制率为55%.A260/A280为1.29,HPLC纯度为99.7%.复制型腺病毒为≤1RCA/3×1010 VP.其他各项检测指标均符合规定.结论: 建立了重组腺病毒人内皮抑素的质量标准及其检测方法,并用于该产品的质量控制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁力勇		22	83	6.0	8.0
2	饶春明		85	287	9.0	12.0
3	李响		19	30	3.0	5.0
4	王军志		95	504	11.0	16.0
5	高凯		21	70	5.0	7.0
6	韩春梅		34	104	6.0	9.0
7	李永红		17	36	3.0	5.0
8	赵阳		15	53	5.0	7.0