Bacillus pumilus WL-11木聚糖酶A的纯化、鉴定及其底物降解方式

• 作者: 许正宏 陶文沂
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 短小芽孢杆菌 木聚糖酶 纯化 底物降解
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 酶工程
• 页码范围: 407-413
• 页数: 7页
• 分类号: Q814.1
• 字数: 6160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.03.013

摘要

对一株Bacillus pumilus WL-11木聚糖酶的纯化、酶学性质及其底物降解模式进行了研究.经过硫酸铵盐析、CM-Sephadex及Sephadex G-75层析分离纯化,获得一种纯化的WL-11木聚糖酶A,其分子量为26.0kD,pI值9.5,以燕麦木聚糖为底物时的表观Km值为16.6mg/mL,Vmax值为1263μmol/(min·mg).木聚糖酶A的pH稳定范围为6.0至10.4,最适作用pH范围则在7.2至8.0之间,是耐碱性木聚糖酶;最适作用温度为45℃～55℃,在37℃、45℃以下时该酶热稳定性均较好;50℃保温时,该酶活力的半衰期大约为2h,在超过50℃的环境下,该酶的热稳定较差,55℃和60℃时的酶活半衰期分别为35min和15min.WL-11木聚糖酶A对来源于燕麦、桦木和榉木的可溶性木聚糖的酶解结果发现,木聚糖酶A对几种不同来源的木聚糖的降解过程并不一致.采用HPLC法分析上述底物的降解产物生成过程发现木聚糖酶A为内切型木聚糖酶,不同底物的降解产物中都无单糖的积累,且三糖的积累量都较高;与禾本科的燕麦木聚糖底物降解不同的是,木聚糖酶A对硬木木聚糖降解形成的五糖的继续降解能力较强.采用TLC法分析了WL-11粗木聚糖酶降解燕麦木聚糖的过程,结果表明燕麦木聚糖能够被WL-11粗木聚糖酶降解生成系列木寡糖,未检出木糖,这说明WL-11主要合成内切型木聚糖酶A,同时发酵液中不合木糖苷酶,适合用来酶法制备低聚木糖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶文沂	江南大学生物工程学院	178	3095	30.0	44.0
5	许正宏	江南大学生物工程学院	241	1740	20.0	30.0