穿透支原体P35蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

• 作者: 余敏君 吴移谋 朱翠明
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 穿透支原体 P35 表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: R375.3
• 字数: 2210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2005.01.009

摘要

目的为研究穿透支原体(Mpe)35 kD脂质相关膜蛋白(P35)的生物学活性,构建其原核细胞表达载体,并在大肠杆菌(E.coli)中表达.方法 PCR扩增p35基因片段,克隆至pQE31载体, 用PCR介导的突变将p35基因中两个"TGA"终止密码子定点突变为"TGG",使其在E.coli中编码表达色氨酸.IPTG诱导pQE31/P35在E.coli 中表达目的蛋白rP35,经Ni-NTA Spin亲和纯化, Western blot分析鉴定表达产物. 结果 PCR扩增出约1kb的DNA片段,克隆至pQE31载体,筛选到阳性克隆pQE31/P35,测序分析 p35基因中两个"TGA"终止密码子成功突变成"TGG". IPTG诱导pQE31/p35在E.coli 中表达分子量约37.4 kD的蛋白质,Western blot分析鉴定其为rP35. 结论构建的pQE31/p35原核表达载体,在E.coli中成功地表达rP35.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余敏君	南华大学微生物学与免疫学教研室	104	491	11.0	17.0
2	朱翠明	南华大学微生物学与免疫学教研室	61	211	7.0	10.0
3	吴移谋	南华大学微生物学与免疫学教研室	243	1097	14.0	22.0