汉坦病毒G2糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其在免疫诊断中的应用

• 作者: 姚苹苹 朱函坪 朱国献 朱智勇 梁伟峰
• 来源期刊: 中国媒介生物学及控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 汉坦病毒 G2包膜糖蛋白 昆虫细胞 间接免疫荧光法
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 199-201
• 页数: 3页
• 分类号: R85
• 字数: 2607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4692.2005.03.014

摘要

目的构建汉坦病毒(HV)Z10株包膜糖蛋白G2基因的重组表达载体,探索其在昆虫细胞中的表达及在免疫荧光诊断中的应用.方法以质粒pUCm-Z10M为模板设计引物,用聚合酶链反应(PCR)扩增Z10株G2基因片段,将G2片段克隆入pUCm-T质粒载体,碱法提取质粒pUCm-Z10-G2,酶切后将回收片段插入杆状病毒转移载体pFastBacHTa,构建重组体pFastBacHTa-Z10-G2,重组体转化感受态细胞E.coli DH10Bac后,经2轮筛选,提取重组质粒转染昆虫细胞sf9,并用间接免疫荧光技术检测表达的G2蛋白.结果获得含有编码HV Z10株的包膜糖蛋白G2基因的重组质粒,转染昆虫细胞表达出G2蛋白,与肾综合征出血热(HFRS)阳性血清反应,昆虫细胞内呈现特异性环状荧光.检测40份HFRS血清,与全病毒细胞抗原片的符合率为95％.结论成功构建HV Z10株包膜糖蛋白G2基因的表达载体,并在昆虫细胞中表达.可利用重组G2蛋白检测HV感染.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚苹苹		58	222	9.0	11.0
2	朱函坪		41	133	6.0	8.0
3	朱智勇		51	171	7.0	9.0
4	朱国献	浙江省杭州市第六人民医院传染科	3	10	2.0	3.0
5	梁伟峰	浙江省杭州市第六人民医院传染科	3	15	2.0	3.0