多级超滤及亲和超滤法分离纯化NADH工艺的研究

• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 化学
• 关键词: 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 膜分离技术 亲和超滤
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 317-322
• 页数: 6页
• 分类号: O652.6
• 字数: 4780字
• 语种: 中文

摘要

研究出一种经济、高效、简便且容易放大的提取、分离和纯化辅酶NADH的工艺条件并进行优化.使用化学渗透法处理啤酒酵母细胞Saccharomyces cerevisiae粗提NADH,多级超滤及亲和超滤法进一步分离和纯化NADH.选用酵母醇脱氢酶(YADH)作为亲和配体,在pH值8.0,离子强度为0.1 mol/L时,用YADH和细胞渗透液中的NADH亲和.使用MWCO=30 000的滤膜超滤.结果:NADH YADH复合物留在截留液中,从而与其它小分子物质分离.改变pH值和离子强度,NADH-YADH复合物解离,通过MWCO=1 000的滤膜超滤,NADH分离到滤过液中,YADH作为截留而回收,回收率达93%,活性损失15%.试验表明使用化学渗透法处理酵母细胞,用亲和超滤纯化可获得高的NADH产率.和以前的方法相比具有简单、经济、省时、高效等特点,且容易放大.