抗vWF与GPIb-IX结合部位的噬菌体呈现型单链抗体制备及功能研究

• 作者: 季顺东 江淼 王迎春 白霞 祝怀平 阮长耿
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: vWF 血栓 抗体/ScFv 表达
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 临床免疫学
• 页码范围: 308-311,314
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3705字
• 语种: 中文

摘要

目的:为了研制新型特异性抗血栓制剂.方法:利用噬菌体展示文库技术筛选与vWF-A1区有高亲合力单链抗体(ScFv);基因重组的方法构建高效表达载体pET-20b(+)-ScFv,在大肠杆菌中诱导表达;夹心ELISA方法鉴定此单抗的抗原结合活性;瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集试验(RIPA)测定ScFv对血小板聚集的抑制作用.结果:噬菌体展示技术筛选的ScFv在大肠杆菌中成功地诱导表达,表达的ScFv占菌体总蛋白的41%,以包涵体形式存在;经纯化复性的ScFv可以与vWF、rvWF-A1、rvWF-A1/A3结合,但不与rvWF-A3、BSA反应;ScFv具有抑制RIPA功能,抑制率为73.7%.结论:在大肠杆菌中高效表达的噬菌体展示技术筛选的抗vWF-A1区ScFv可特异性与vWF-A1区结合,而抑制瑞斯脱霉素诱导的血小板聚集,显示出很好的应用前景,为研制新型抗栓药物奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祝怀平		1	0	0.0	0.0
2	王迎春		1	0	0.0	0.0
3	季顺东		1	0	0.0	0.0
4	江淼		1	0	0.0	0.0
5	白霞		1	0	0.0	0.0