微丝相关蛋白hHBRK1突变体的构建、表达及纯化

• 作者: 周平坤 徐勤枝 白贝 隋建丽 雷呈祥 颜贤忠
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: hHBRK1 肌动蛋白类 基因突变 融合蛋白 微丝蛋白质类 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 528-530,553
• 页数: 4页
• 分类号: Q754
• 字数: 2659字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2005.06.009

摘要

目的:构建微丝相关蛋白hHBRK1截短体和突变体原核表达载体,并表达及纯化融合蛋白.方法:采用常规PCR并结合定点突变技术,对hHBrk1基因进行缺失和点突变;利用限制性内切酶将PCR产物克隆至原核表达载体pGEX-4T;IPTG诱导融合蛋白表达,通过谷胱甘肽-琼脂糖纯化技术分离纯化GST融合蛋白.结果与结论:构建了包括氨基端缺失截短体hHBRK1-ΔN、羧基端缺失截短体hHBRK1-ΔC和点突变蛋白hHBRK1-S56G57在内的原核表达质粒,分离获得较高纯度的重组hHBRK1突变体融合蛋白,Western杂交证实纯化蛋白为GST融合蛋白.本实验为进一步研究hHBRK1的相互作用蛋白及其可能的结合位点提供了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周平坤	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	108	511	11.0	16.0
2	隋建丽	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	26	136	7.0	10.0
3	徐勤枝	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	39	280	8.0	15.0
4	雷呈祥	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	48	331	10.0	15.0
6	颜贤忠	军事医学科学院仪器测试分析中心	25	468	11.0	21.0
9	白贝	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	7	24	3.0	4.0