禽多杀性巴氏杆菌C48-1成熟外膜蛋白H基因原核表达最适条件的探索

• 作者: 曹素芳 邓宪方 韩先干 黄青云
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 禽 多杀性巴氏杆菌 成熟外膜蛋白H基因 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹法 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61
• 字数: 2885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.01.010

摘要

应用PCR扩增出禽多杀性巴氏杆菌C48-1成熟外膜蛋白H基因(ompm H),将ompm H片段按正确的阅读框定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,获得了重组表达质粒pGEX-ompm H.然后将重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),当转化菌的D600nm值达到0.6～0.8时,对异丙基硫代-?-D-半乳糖苷(IPTG)的诱导浓度、诱导时间和诱导温度等条件进行了试验,根据聚丙烯酰胺凝胶电泳判定融合蛋白GST-ompmH表达的最适条件.结果,当细菌的D600 nm值为0.6～0.8时,IPTG最佳诱导浓度为0.8 mmol/L,最佳诱导时间为4h,最适诱导温度为25℃.并用免疫印迹法对表达产物进行检测,结果显示表达的融合蛋白GST-ompmH能与C48-1外膜蛋白免疫血清发生特异性反应,证明pGEX-6p-1载体表达的融合蛋白保留了天然蛋白的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹素芳	华南农业大学兽医学院	17	133	7.0	11.0
2	黄青云	华南农业大学兽医学院	31	248	9.0	14.0
3	韩先干	华南农业大学兽医学院	7	30	4.0	5.0
4	邓宪方	华南农业大学兽医学院	6	30	4.0	5.0