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摘要:
从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素-1(Gallinacin-1,Gal-1)cDNA,将扩增产物与pGEM-T Easy载体相连,经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为198bp,与报道的Gal-1cDNA编码区碱基序列完全相同.分析核苷酸序列表明Gal-1与火鸡异嗜性白细胞肽-1(Turkey heterophil pep-tides,THP-1)具有85.4%同源性.氨基酸序列方面Gal-1与THP-1同源性最高,为72.7%.将Gal-1基因成熟肽片段插入到酵母表达载体pPICZα-C,构建重组表达载体pPICZα-C-gal-1,电转入表达宿主菌X-33,Zeocin抗性筛选重组菌株.挑取阳性菌株经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE电泳发现在约4.5 ku位置出现预期条带.对其抗菌活性检测发现具有抗大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等细菌的活性.反相高效液相色谱表明阳性菌株表达产物与标准品在层析柱中保留时间一致.
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文献信息
篇名 鸡β-防御素-1cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达
来源期刊 畜牧兽医学报 学科 农学
关键词 β-防御素-1 克隆 毕赤酵母 表达
年,卷(期) 2005,(8) 所属期刊栏目 畜牧
研究方向 页码范围 767-772
页数 6页 分类号 S831.2|S852.4+2
字数 4636字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.08.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 毕英佐 华南农业大学动物科学学院 216 2631 28.0 41.0
2 曹永长 华南农业大学动物科学学院 111 1387 20.0 31.0
3 马静云 华南农业大学动物科学学院 87 548 13.0 19.0
4 张辉华 华南农业大学动物科学学院 18 278 9.0 16.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
β-防御素-1
克隆
毕赤酵母
表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
畜牧兽医学报
月刊
0366-6964
11-1985/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号
82-453
1956
chi
出版文献量(篇)
5501
总下载数(次)
6
总被引数(次)
62883
相关基金
广东省科技攻关计划
英文译名:
官方网址:http://www.gdstc.gov.cn/other/kjjhgl_nykjggjh.htm
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导