EBV-LMP1 cDNA克隆与真核表达载体的构建及体外表达

• 作者: 刘涛 梁传余 田聆 赵菊梅
• 来源期刊: 华西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 潜伏膜蛋白1(LMP1) cDNA克隆 核酸测序 真核表达载体 质粒pIRES
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 426-429
• 页数: 4页
• 分类号: R687
• 字数: 4997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-0179.2005.03.006

摘要

目的:从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)cDNA,构建真核表达质粒pIRES-LMP1,并检测其在体外的表达.方法:利用分子生物学技术,提取鼻咽癌总RNA,逆转录PCR获得LMP1cDNA,克隆入pDrive Cloning Vector并测序,利用引物上设计的酶切位点NheI和EcoRI将LMP1插入真核表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Western blot检测LMP1的表达.结果:扩增的LMP1cDNA为1301bp,核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1分子.结论:实验所构建的pIRES-LMP1表达质粒能在体外表达LMP1分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁传余	四川大学华西医院耳鼻喉科	287	1719	19.0	26.0
2	刘涛	四川大学华西医院耳鼻喉科	82	496	12.0	19.0