禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达

• 作者: 谢丽基 谢芝勋
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 σNS基因 克隆表达 pGEX-4X-1
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 964-968
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.4|Q876
• 字数: 4887字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.12.009

摘要

采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pGEX-S1133-σNS和pGEX-R2-σNS.构建好的重组质粒经37 ℃ 1 mmol/L IPTG诱导、SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,显示目的蛋白以包涵体方式表达,其蛋白质分子质量约为66.2 ku,约占菌体总量的31.5%～34.8%.Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢芝勋		139	1616	23.0	31.0
2	谢丽基	广西大学动物科技学院	4	11	1.0	3.0