禽呼肠孤病毒(ARV)p10蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 何至远 吴海洋 曹红 李晓齐 王永强 郑世军
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 p10蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 20-23,26
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.4
• 语种: 中文

摘要

为了深入研究禽呼肠孤病毒(ARV)的致病机理,从其基因组中克隆病毒非结构蛋白p10基因,并将其与原核表达载体连接,转入大肠杆菌BL21中,使其表达携带His标签的p10融合蛋白,经镍柱纯化得到高纯度重组p10蛋白,以该蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得2株能够稳定分泌针对p10蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为2B12与4H10.通过间接ELISA(Enzyme-linked immunosorbentassay)方法测定其腹水效价均为1∶1.01×107,亲合力解离常数(kD)分别为3.91×10-10、5.75×10-10,2株单抗的IgG亚型均为IgG2b.经Western Blot鉴定,该2株抗体均能特异性识别ARV感染DF-1细胞中的p10蛋白.这些单抗的制备为深入研究ARV的致病机理奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永强	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	25	52	4.0	7.0
2	郑世军	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	29	97	6.0	9.0
3	曹红	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	26	117	7.0	10.0
4	李晓齐	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	17	19	3.0	3.0
5	何至远	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
6	吴海洋	中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室	3	8	2.0	2.0