绵羊钙调蛋白调节基因Calponin h1的分子克隆

• 作者: 刘海波 宋俊芳 岳作军 张晓娟 张毅 朱朝辉 谭萍萍 马润林 黄朝峰
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 绵羊 Caiponin 分子克隆
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 357-362
• 页数: 6页
• 分类号: Q958
• 字数: 3585字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2005.03.005

摘要

在一项研究中发现,雌激素受体在胚胎发育后期对绵羊子宫平滑肌Calponin(CaP)基因的活动有明显上调作用,而CaP-直被作为观察其他基因表达水平变化的基准参照基因(Reference Gene).迄今为止,绵羊CaP尚未完整克隆,为进一步了解其结构和功能,根据人、小鼠和家猪的同源保守区序列设计锚定寡核苷酸引物,通过5′-RACE及3′-RACE方法克隆了绵羊子宫平滑肌组织全长CaP h1 cDNA(GenBank登录号:AY327118),在cDNA序列的基础上,又通过PCR-SSP方法获得了CaP h1基因除内含子1、2之外的其余4个内含子全部序列(GenBank登录号分别为:AY771807,AY771808,AY771809,AY771810).DNA序列测定和分析表明,绵羊子宫平滑肌CaPh1 cDNA全长1499 bp,编码297个氨基酸,5′-UTR及3′-UTR分别为79 bp和529 bp.CaP h1基因组DNA的克隆和序列分析表明,绵羊CaP全长约8kb,由7个外显子和6个内含子组成.同源序列比较发现,该基因外显子在不同物种间相对保守;与人类、野猪、小鼠、大鼠和鸡Caiponin mRNA同源性分别为88%、92%、81%、79%和81%,但不同物种间内含子存在较大差异(＞50%).填补了绵羊CaP基因分子克隆的空白,为进一步研究该基因的功能及子宫平滑肌收缩的调节机理奠定了基础.