牙龈卟啉单胞菌prtC基因原核表达系统构建及牙周损伤与局部PrtC水平的关系

• 作者: 严杰 罗耀东 阮萍
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 胶原酶 prtC基因 克隆/表达 抗原性/免疫反应性 PrtC/牙周破坏
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 369-374
• 页数: 6页
• 分类号: R378
• 字数: 789字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.05.001

摘要

目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系.方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株扩增出全长prtC基因片段,T-A克隆后测序.采用pET32a质粒和大肠杆菌BL21DE3株构建prtC基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rPrtC的表达.采用Western blot检测rPrtC的抗原性和免疫反应性.建立ELISA,检测人慢性牙周炎龈下菌斑标本中的PrtC水平.结果牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株prtC基因核苷酸序列完全相同.与报道的相应序列比较,克隆的prtC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.46% 和99.07%.在不同浓度的IPTG诱导下, rPrtC的产量高达细菌总蛋白的50%左右.rPrtC能与牙龈卟啉单胞菌全菌抗体结合,并能有效地诱导家兔产生特异性抗体.91.39%的人慢性牙周炎龈下菌斑标本中可检出PrtC,重度牙周炎标本中PrtC水平明显高于轻度牙周炎(P＜0.05).结论本研究成功地构建了牙龈卟啉单胞菌prtC基因高效原核表达系统.rPrtC具有良好的抗原性和免疫反应性,可作为研制牙龈卟啉单胞菌疫苗和血清学检测试剂盒的候选抗原.人慢性牙周炎的牙周破坏程度与局部PrtC水平密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院	265	1149	14.0	20.0
2	罗耀东	浙江大学医学院	11	36	3.0	6.0
3	阮萍	浙江省绍兴文理学院医学院病原生物学教研室	2	4	2.0	2.0