禽副粘病毒-2膜融合相关多肽基因的构建与表达

• 作者: 张国中 朱德兵 柏亚铎 汪明 王晓佳
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽副粘病毒-2 球状头部与茎部区域 七肽重复区域 搭桥PCR
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 228-234
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 5323字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2005.03.007

摘要

囊膜病毒与宿主细胞的膜融合是病毒入侵宿主细胞的第一步.禽副粘病毒-2(APMV-2)囊膜表面糖蛋白有2种,与宿主受体结合的血凝素神经氨酸酶(HN)及介导膜融合的融合糖蛋白(F).HN蛋白的茎部区域(stalk region)与球状头部区域(globularhead region),以及F蛋白的3段七肽重复区域(heptad repeat,HR)都可能与膜融合直接相关,将5段多肽进行基因的构建与表达研究.根据已发表的禽副粘病毒-1(APMV-1)氨基酸序列,应用BLAST程序进行同源性分析,以确定APMV-2相应区域,使用搭桥PCR或普通PCR方法构建基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-I获得重组质粒,阳性重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),表达后获得可溶性融合蛋白,3C蛋白酶酶切后的蛋白质混合物经Glutathione-Sepharose 4B亲和层析纯化,最终获得可溶性、高纯度的5段多肽.应用LeamCoil-VMF软件与ExPASy系列软件对蛋白质结构与功能进行预测与分析.分子筛实验结果表明,F蛋白的HRI与HR2可形成六聚体结构,圆二色谱实验结果则表明,六聚体蛋白富含α螺旋结构.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	张国中	中国农业大学动物医学院	74	339	9.0	14.0
3	朱德兵		9	53	4.0	7.0
4	王晓佳	中国农业大学动物医学院	13	46	4.0	6.0
5	柏亚铎	中国农业大学动物医学院	5	15	2.0	3.0