建立巢式PCR和异源双链法检测石蜡标本麻风菌DDS耐药株

• 作者: 李桓英 温艳 翁小满
• 来源期刊: 中国麻风皮肤病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 麻风病 复发 耐药检测 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 847-850
• 页数: 4页
• 分类号: R75
• 字数: 3908字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-1157.2005.11.003

摘要

目的:为了能检出石蜡包埋组织中麻风菌氨苯砜(DDS)的耐药基因folP1,有必要建立敏感、特异的巢式PCR,为开展回顾性麻风菌DDS耐药流行病学研究服务.方法:从石蜡组织中提取麻风菌DNA,建立巢式PCR,优化PCR条件,扩增DDS耐药基因片段.用异源双链法筛选突变菌株,并经直接测序进一步证实.结果:巢式PCR将PCR检测folP1的敏感性,从6.5%(3/46)提高到76.7%(33/43);优化后的巢式PCR,最终使敏感性更进一步提高至90.7%(39/43).8株folP1突变菌、两种突变型被发现.结论:巢式PCR是一项快速、简便、可行的方法.通过优化多项PCR条件,提高了石蜡包埋组织中folP1检测的敏感性和特异性.异源双链法可用于筛选DDS耐药突变菌株.