HBsAg和人微小病毒B19 VP2联合抗原的克隆及表达

• 作者: 张世杰 曹明瑞 李一冬 杨书钦 赵国强 赵新合
• 来源期刊: 河南科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 乙型肝炎表面抗原 人微小病毒B19 联合疫苗 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 241-244
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 2582字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-688X.2005.04.001

摘要

目的构建乙肝表面抗原-人微小病毒B19 VP2融合蛋白的原核表达系统,并检测其表达蛋白的抗原反应性.方法用PCR扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因及B19病毒VP2基因,分别重组入pGEM-T,构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pQE30表达载体中,得到pQE30-HBs;再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pQE30-HBs中,得到pQE30-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定.结果pQE30-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,Western-blot检测结果显示所表达融合蛋白均可与抗-HBs和抗-VP2结合反应.结论成功构建pQE30-HBs-VP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的HBsAg和VP2蛋白的双重抗原的反应原性.从而建立了表达B19和HBV的联合抗原表达系统,同时给HBV和B19病毒重组联合疫苗的研制和复合诊断试剂提供了抗原参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一冬	郑州大学第一附属医院妇产科	8	14	3.0	3.0
2	曹明瑞	郑州大学第一附属医院妇产科	7	14	2.0	3.0
3	赵国强	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
4	张世杰	郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室	22	55	4.0	6.0