摘要:
目的建立大鼠不同脑区3种游离型神经甾体的测定方法.方法甾体分两步萃取,首先用乙酸乙酯-正己烷(90:10)提取甾体,然后经固相萃取纯化.游离型甾体进行衍生化后应用高效液相色谱-质谱分离测定,选择甲基睾丸酮作为内标.结果去氢表雄酮的线性范围为0.030-2.00μg·L-1,孕烯醇酮和别孕烯醇酮的线性范围为0.025-2.00μg·L-1.正常雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠不同脑区甾体去氢表雄酮(DHEA),孕烯醇酮(PREG)和别孕烯醇酮(AP)的含量分别为额叶皮质(0.70±0.23),(4.8±1.9),(1.1±0.6)ng·g-1,海马(0.57±0.28),(6±3),(0.5±0.3)ng·g-1,杏仁核(1.5±1.0),(9±5),(1.4±0.9)ng·g-1,纹状体(0.52±0.14),(7.7±2.8),(0.5±0.6)ng·g-1,伏隔核(2.9±1.6),(18±9),(1.6±1.3)ng·g-1,垂体(4.0±2.0),(27±12),(0.8±0.5)ng·g-1,下丘脑(1.7±1.2),(16±10),(0.8±0.7)ng·g-1.结论 3种神经甾体都有良好的线性关系和准确度,本方法可满足大鼠不同脑区内游离型甾体的分离测定.