tPA突变体在哺乳动物细胞中的表达

• 作者: 于芳 周晓巍 李朝 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: tPA突变体 CHO-dhfr-细胞 表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 278-279,286
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2005.03.015

摘要

利用携带有二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的pCI载体,实现tPA突变体(FrGGI)在CHO-dhfr-细胞中的高效表达,获得高表达细胞株.采用分子克隆常规技术,将去除3'端非蛋白编码区的tPA突变体cDNA与pCI载体连接,构建真核表达载体pCI-tPA;采用阳离子脂质体转染法转染CHO-dhfr-细胞.经酶切及测序鉴定,证明所构建的质粒正确,转染CHO-dhfr-细胞后,经过MTX加压筛选,得到了10株表达水平较高的细胞株,其活性可达每106细胞4000U/24h.以上结果为进行tPA突变体工程细胞株的筛选奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于芳	军事医学科学院生物工程研究所	27	68	5.0	7.0
2	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
3	周晓巍	军事医学科学院生物工程研究所	43	220	8.0	13.0
4	李朝	军事医学科学院生物工程研究所	9	58	4.0	7.0