FTA滤膜用于PCR检测肉中的金黄色葡萄球菌

• 作者: 何俊萍 刘景武 周巍 张伟 袁耀武
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR FTA滤膜 金黄色葡萄球菌 鲜肉
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1009-1013
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.99
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.028

摘要

利用FFA滤膜,采用PCR技术可直接检测肉及肉制品中的金黄色葡萄球菌,无需增菌,灵敏度高.在采用浮选与溶剂萃取相结合方法的基础上,使用FFA膜可高效地从鲜肉中提取金黄色葡萄球菌的DNA,消除PCR反应的抑制因子.以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因(nuc)为靶基因,经过PCR扩增得到279bp的产物.经过DNA测序证实该产物为目的扩增产物.使用FTA滤膜处理样品,再通过PCR方法检测金黄色葡萄球菌,猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉匀浆液的检出限均为10cfu/mL,可在6h内完成对肉中金黄色葡萄球菌的检测,比目前普遍采用的先增菌再进行PCR检测的方法缩短了12～24h.实际检测了72份样品,同时与GB 4789.10-94方法及两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌检测方法做比较,PCR方法的检出率为72.2%,检出时间为6h,GB 4789.10-94方法检出率为70.8%,检出时间为5d,Prfilm RSA方法的检出率为61.1%,检出时间为18h,Baird-Parker R.P.F方法的检出率为69.4%,检出时间为18h,结果表明FTA滤膜用于PCR检测肉中金黄色葡萄球菌检出率高,耗时短.使用FTA滤膜法制备模板DNA,为食品中的致病菌快速检测构建了一个技术平台.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁耀武	河北农业大学食品科技学院	52	485	11.0	21.0
2	张伟	河北农业大学食品科技学院	241	2103	25.0	35.0
3	周巍	河北农业大学食品科技学院	11	138	6.0	11.0
4	何俊萍	河北农业大学食品科技学院	37	304	11.0	16.0
5	刘景武	河北农业大学食品科技学院	4	77	3.0	4.0