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摘要:
目的构建梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)外膜蛋白Gpd基因的原核表达载体,检测其表达产物的免疫原性,并比较梅毒螺旋体各菌株Gpd基因序列的同源度。方法 从Tp Nichols株基因组模板中PCR扩增Gpd基因,与 GenBank登录的序列做blast比较,定向克隆构建原核表达重组体pET28b(+)-Gpd,转入大肠杆菌ril表达菌,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western-blot检测重组蛋白的免疫原性。结果 载体上所连目的基因片段序列与GenBank登录的Nichols株Gpd基因序列完全一致,同其他病原性密螺旋体菌株登陆序列比较同源度为98%~100%。SDS-PAGE检测诱导产物显示有一Mr约为41 kDa的特异蛋白带,免疫印迹技术检测其能与梅毒阳性标准血清反应。结论 Tp原核表达重组体pET28b(+)-Gpd成功构建,且能够在ril表达菌中融合表达,为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了一定的实验基础。
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文献信息
篇名 梅毒螺旋体外膜蛋白Gpd的基因型分析及其重组蛋白的免疫原性鉴定
来源期刊 南华大学学报(医学版) 学科 生物学
关键词 梅毒螺旋体 Gpd基因 原核表达
年,卷(期) 2005,(1) 所属期刊栏目 基础论著
研究方向 页码范围 29-32,36
页数 5页 分类号 Q784
字数 2472字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.2095-1116.2005.01.008
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梅毒螺旋体
Gpd基因
原核表达
研究起点
研究来源
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中南医学科学杂志
双月刊
2095-1116
43-1509/R
16开
湖南省衡阳市南华大学校内
1973
chi
出版文献量(篇)
4664
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4
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