抗CD20嵌合抗体的表达与活性检测

• 作者: 师明磊 李世崇 胡显文 陈惠鹏 高丽华
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 非霍奇金淋巴瘤 CD20 单克隆抗体 嵌合抗体
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 3483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8135.2005.07.006

摘要

表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定.设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列.运用重叠延伸PCR,连接可变区与恒定区,将轻、重链基因连接至pIRES双表达载体.将质粒以阳离子脂质体转染CHO细胞,ELISA挑选阳性克隆,共获得7株表达较高的克隆,表达量约为2mg/L.扩大培养阳性克隆anti-CD20-1B3,收获上清,以蛋白A进行亲和层析纯化表达蛋白.SDS-PAGE检测表明纯化纯度达到95%,蛋白相对分子量与理论值吻合.以CD20+细胞Raji、Daudi、Ramous检测,表明该抗体能与CD20抗原特异性结合,体外杀伤试验说明抗体能够杀伤CD20+淋巴瘤细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈惠鹏	军事医学科学院生物工程研究所	143	885	15.0	23.0
2	李世崇	军事医学科学院生物工程研究所	47	184	7.0	10.0
3	高丽华	军事医学科学院生物工程研究所	37	174	7.0	12.0
4	师明磊	军事医学科学院生物工程研究所	17	69	5.0	7.0
5	胡显文	军事医学科学院生物工程研究所	67	596	13.0	22.0