金丝桃素合成酶基因的克隆及其表达

• 作者: 孙君社 张娜 张秀清 王力
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 金丝桃素 贯叶连翘 金丝桃素合成酶
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 页码范围: 1-3
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.2005.04.001

摘要

自然条件下金丝桃素在植物中的含量较低且不稳定,提取工艺受其他物质的影响较大,在一定程度上限制了金丝桃素在医药、食品等领域的应用.为了研究金丝桃素合成途径并实现其体外转化,以贯叶连翘愈伤组织总RNA为模板,经RT-PCR扩增得到了编码金丝桃素合成酶的全长cDNA,即Hyp基因.将该基因克隆到原核表达载体pET30a中,成功构建金丝桃素合成酶表达载体pET30a-Hyp,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中.含有重组质粒的克隆在IPTG诱导下,表达出金丝桃素合成酶融合蛋白,利用Ni柱纯化菌体裂解上清中表达的融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE分析,结果Hyp基因得到了高效表达,大小约为20 kD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张娜	中国农业大学食品科学与营养工程学院	18	300	9.0	17.0
2	张秀清	中国农业大学食品科学与营养工程学院	32	192	8.0	12.0
3	孙君社	中国农业大学食品科学与营养工程学院	122	1924	25.0	35.0
4	王力	中国农业大学食品科学与营养工程学院	10	227	6.0	10.0