分泌性BACE1蛋白在昆虫细胞的表达

• 作者: 谢佐平 赖燕来 邢长虹
• 来源期刊: 科学技术与工程
• 学科: 生物学
• 关键词: β-secretase 真核表达 昆虫细胞 Alzheimer's病
• 年，卷（期）: 2005,（17）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 1252-1255
• 页数: 4页
• 分类号: Q349+.53
• 字数: 2938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-1815.2005.17.006

摘要

为了获得有活性的重组β-secretase并研究其功能,寻找特异性抑制剂,应用RT-PCR技术,从人胚胎脑组织特异性扩增并克隆了人BACE1编码基因的胞外片断(BACE1-454).测序后与质粒pFastBac连接,得到含BACE1-454基因的重组质粒pFast-BACE1-454.将其转化到含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中进行转座重组,用琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增对重组穿梭载体Bacmid-BACE1-454进行鉴定.将Bacmid-BACE1-454经脂质体介导转染Sf9细胞,收获病毒.用重组杆状病毒颗粒感染昆虫细胞,表达蛋白,免疫印迹证实所获蛋白产品具有特异的免疫反应性.