BACE1基因RNA干扰质粒的构建及干扰效果的鉴定

• 作者: 张璇 胡海梅
• 来源期刊: 北京生物医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: BACE1 基因 RNA干扰 neuro-2a细胞
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 579-582
• 页数: 4页
• 分类号: R318|Q75
• 字数: 2408字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-3208.2013.06.06

摘要

目的 构建BACE1基因干扰质粒,并研究其在neuro-2a细胞中的表达,为以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的质粒.方法 选择人、小鼠和大鼠的BACE1基因共有序列为干扰靶点,设计3组连接有GFP的干扰质粒,将构建好的质粒转染neuro-2a细胞,通过Real time RT-PCR及Western-blotting的方法分别在RNA及蛋白质水平上检测BACE1的表达,以分析其干扰的效率.结果 经酶切及测序证实,插入的DNA片段序列与设计序列完全一致.与空质粒对照组相比,3个干扰靶点对BACE1基因的表达均有不同程度的抑制作用.其中pYr-1.1-siBACE1在mRNA水平及蛋白质水平干扰效果均最好.结论 成功构建了BACE1基因的干扰质粒pYr-1.1-siBACE1,并能有效抑制neuro-2a细胞内源性BACE1基因表达,为靶向BACE1基因的治疗提供了有力的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张璇		11	30	4.0	5.0
2	胡海梅		13	13	2.0	3.0